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本课程起止时间为:2020-04-03到2020-09-17
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第一章 药用蛋白概述 第一章测试

1、 问题:药用蛋白是指具有明确的生物活性,可用于防治、诊断人类、动物或植物疾病、化学性质为肽或蛋白质的物质。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【正确

2、 问题:基因重组技术可以精确控制重组蛋白的氨基酸组成。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【正确

3、 问题:基因重组技术生产的药用蛋白质量远高于化学合成或提取分离。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【错误

4、 问题:重组疫苗是一种临床用重组蛋白。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【错误

5、 问题:活性高、特异性强、功能明确都是药用重组蛋白的典型特点。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【正确

6、 问题:临床用加压素、缩宫素、胰岛素均可通过化学合成生产。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【错误

7、 问题:药用蛋白可从植物、动物、微生物、化学合成、______获得。
答案: 【基因重组

8、 问题:被批准可用于临床不育症治疗的重组蛋白是______。
答案: 【卵泡刺激激素

【作业】第一章 药用蛋白概述 第一章作业

1、 问题:重组药用蛋白与药用蛋白的异同?
评分规则: 【 药用蛋白是指具有明确的生物活性,可用于防治、诊断人类、动物或植物疾病、化学性质为肽或蛋白质的物质,其经典制备方法主要是从原材料中提取分离或者化学合成,但是原材料中药用蛋白含量很低,获得高纯度制品不易,而化学合成主要适用于小肽;重组药用蛋白则是指利用基因工程技术在工程细胞中制备的药用蛋白,多肽序列可以通过人为设计的编码序列进行精确控制,适合规模化生产,对于药用蛋白的生产具有广泛适用性。

2、 问题:重组药用蛋白具有突出特点?
评分规则: 【 活性高、特异性强、功能明确、毒副作用小、种类多、更符合临床应用要求。

3、 问题:各写出 3 种来源于植物、动物、微生物、化学合成的药用蛋白。
评分规则: 【 动物:肽类激素、凝血因子、生长激素等;植物:凝集素、甜蛋白、植物毒蛋白等;微生物:抗菌肽、多粘菌素、链激酶等;化学合成:加压素、缩宫素、生长抑素、胸腺肽等。

4、 问题:写出5种临床用狭义重组药用蛋白及其主要药效。
评分规则: 【 胰岛素:主要治疗糖尿病;人生长激素:生长激素缺乏症(不可替代);β–干扰素:多发性硬化症;组织纤溶酶原激活蛋白:白血病、缺血性肝炎;人促红细胞生成素:贫血;卵泡刺激激素:不育症、调节排卵;各种凝血因子:血友病(必需药物);粒细胞集落刺激因子:癌症、化疗辅助药;胰高血糖素:低血糖症;尿激酶:冠状动脉栓塞(8-12h)、急性心肌梗死等。(备注:任意5种即可)

5、 问题:为什么狭义重组蛋白不包括单克隆抗体和重组疫苗?
评分规则: 【 因为单克隆抗体是将能够产生某种单一抗体的B淋巴细胞与能够无限增殖的骨髓瘤细胞融合、利用融合细胞生产的,不涉及直接的基因操作;而重组疫苗则是利用基因工程技术制备的减毒或无毒核酸制品。

第二章 药用蛋白的编码基因与表达 第二章测试

1、 问题:用中国仓鼠卵巢细胞系CHO生产促红细胞生成素EPO的关键原因是______。
选项:
A:可高密度培养
B:可大规模生产
C:方便纯化
D:正确糖基化
答案: 【正确糖基化

2、 问题:外源表达重组蛋白时,常选用诱导型启动子,主要是因为______。
选项:
A:缩短培养时间 
B:降低本底表达对细胞生长的影响
C:节约成本
D:增加生物量
答案: 【降低本底表达对细胞生长的影响

3、 问题:以下可以作为重组蛋白表达系统的是______。
选项:
A:无细胞提取物
B:细胞
C:组织
D:器官
E:完整机体
答案: 【无细胞提取物;
细胞;
组织;
器官;
完整机体

4、 问题:表达载体必需启动子序列,是因为______。
选项:
A:启动子决定基因表达的方向
B:启动子决定基因表达水平
C:启动子序列可被其他因子激活
D:启动子决定翻译起点
答案: 【启动子决定基因表达的方向;
启动子决定基因表达水平;
启动子序列可被其他因子激活

5、 问题:以下可视为大肠杆菌表达系统优点的是______。
选项:
A:遗传背景清楚
B:蛋白表达水平高
C:转基因操作简单
D:周期短、成本低
E:翻译后修饰加工能力较低
答案: 【遗传背景清楚;
蛋白表达水平高;
转基因操作简单;
周期短、成本低

6、 问题:真核蛋白的编码基因基本为断裂基因,其编码序列多通过RT-PCR获得。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【正确

7、 问题:外源表达药用重组蛋白时,无需进行密码子优化。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【错误

8、 问题:核糖体结合位点是原核和真核细胞表达药用重组蛋白必需的。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【正确

9、 问题:原核mRNA不经由转录后加工直接具有翻译模板功能。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【正确

10、 问题:具有复杂翻译后修饰的药用蛋白可以用大肠杆菌表达生产。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【错误

11、 问题:温度敏感型启动子就是高温触发表达的启动子。(  )
选项:
A:正确
B:错误
答案: 【错误

【作业】第二章 药用蛋白的编码基因与表达 第二章作业

1、 问题:原核蛋白质编码基因与真核蛋白质编码基因的异同?
评分规则: 【 原核蛋白质编码基因无内含子,而真核蛋白质编码基因基本为断裂基因,编码序列被非编码序列间隔开;密码子使用偏好不同;5´-UTR、3´-UTR复杂程度不同;核糖体识别序列不同。

2、 问题:画出真核生物成熟mRNA的简图(标注两端及重要结构),列出真核生物mRNA的5种加工方式及其与原核mRNA加工方式的不同。
评分规则: 【 真核生物mRNA的5种加工方式:5´-cap添加、3´-核苷酸切除、3´-poly(A)添加、剪接、共价修饰(甲基化等);原核mRNA不经由转录后加工直接具有翻译模板功能。

3、 问题:启动子序列对基因表达的影响有哪些?
评分规则: 【 启动子序列对基因表达具有重要影响:1)启动子决定基因表达的方向。克隆至启动子下游的基因,其密码子阅读方向必须与启动子方向一致,因此在工程细胞中表达生产药用蛋白时,应当进行定向克隆;2)启动子强弱决定基因表达水平。因此用于表达重组药用蛋白的启动子应当能引发高效转录;3)启动子驱动基因转录的效率可被一些调节序列调控。如增强子序列,可大幅度提高基因转录的效率,在真核基因表达中经常使用。

4、 问题:下图所示为基因表达盒,箭头所示为基因表达方向,表中所列为不同刺激条件下基因表达情况(“+”表示表达、“-”表示不表达),根据表中数据判断不同基因的启动子类型。
评分规则: 【

5、 问题:将第4题中基因表达盒导入原核细胞中,予以物质A刺激或低温刺激,可检测到基因表达。但是将上述基因表达盒导入哺乳动物细胞中,在物质A刺激或低温刺激下,均检测不到基因表达。试解释原因?
评分规则: 【 题中基因表达盒在哺乳动物细胞中不表达的原因有可能是以下几个方面:1)因为表达盒所带启动子是原核启动子,不能有效被真核细胞RNAP识别、结合,因此不能有效表达;2)表达产物在哺乳动物细胞中不稳定,很快被酶降解;3)基因沉默。真核细胞中复杂的基因表达调控机制导致被导入的基因不能表达。

第三章 重组药用蛋白的生产 第三章测试

1、 问题:利用PCR法扩增目的基因的前提条件是______。
选项:
A:序列已知
B:序列小于2000bp
C:Tm适中

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