2020 基因工程(长沙学院) 最新满分章节测试答案

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本课程起止时间为:2020-02-24到2020-06-30
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【作业】第一章 绪论 第一章 作业题

1、 问题:简述基因工程的概念及基本步骤。
评分规则: 【 1、基因工程的概念：利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
2、基因工程的步骤：第一步：获取目的基因；第二步：目的基因与运载体结合；第三步：目的基因的导入；第四步：目的基因的检测和表达。
】

第一章 绪论 第一章 测试题

1、 问题:基因工程的设计施工是在什么水平上进行的？
选项：
A:细胞
B:细胞器
C:分子 
D:原子
答案: 【分子 】

2、 问题:基因工程操作的第一步是
选项：
A:目的基因表达
B:载体的酶切
C:获取目的基因
D:重组子的筛选
答案: 【获取目的基因】

3、 问题:根据基因工程的定义，下列各名词中能替代基因工程的是
选项：
A:基因诱变
B:分子克隆
C:DNA重组
D:遗传工程
答案: 【分子克隆;
DNA重组;
遗传工程】

4、 问题:基因工程操作的三大基本元件是
选项：
A:供体
B:配体
C:受体
D:载体
答案: 【供体;
受体;
载体】

5、 问题:基因工程的单元操作顺序是拼接→剪切→导入→表达。
选项：
A:正确
B:错误
答案: 【错误】

【作业】第二章 基因工程的酶学基础 第二章 作业题（1）

1、 问题:请上网查找一种常见的限制性内切酶，描述其酶切位点、反应体系和反应条件。
评分规则: 【 XhoI酶的酶切识别位点是： C*TCGAG
XhoI酶的酶切反应体系：酶1 μL，buffer 2 μL，DNA 1 μg，加灭菌水定量到20μL
XhoI酶的酶切反应条件：37°C（可在水浴锅中进行），反应时间一般为4-6小时
】

【作业】第二章 基因工程的酶学基础 第二章 作业题（2）

1、 问题:简述DNA连接酶的种类及影响连接反应效率的主要因素。
评分规则: 【 1、DNA连接酶的种类包括：大肠杆菌连接酶，T4噬菌体连接酶，热稳定DNA连接酶。
2、影响连接反应效率的主要因素包括：1）温度，2）ATP的浓度，3）连接酶浓度，4）反应时间，5）插入片段和载体片段的摩尔比。
】

【作业】第二章 基因工程的酶学基础 第二章 作业题（3）

1、 问题:请上网查找一种DNA聚合酶，描述其反应体系和反应条件（可参考Takara生物产品：http://www.takarabiomed.com.cn/Product.aspx?m=20141215102854153148#p，天根生物产品：http://www.tiangen.com/?productSearch/t/0/k/Taq.html等）
评分规则: 【 1、ExTaq酶反应体系：(1) TaKaRa Ex Taq（5 U/μl） 0.25 μl； (2) 10×Ex Taq Buffer（Mg2+ plus）（20 mM） 5 μl；(3) dNTP Mixture（各 2.5 mM）4 μl；(4) Template 1 μl；(5) 正向引物 2 μl；(6) 反向引物 2 μl；(7) 灭菌水 35.75 μl。
2、ExTaq酶反应条件：(1) 94℃预变性3min ;(2) 94℃变性40s;(3) 55℃退火40s;(4) 72℃延伸2min，32个循环；(5) 72℃下延伸10min;(6) 4 ℃条件下保存。
】

第二章 基因工程的酶学基础 第二章 测试题

1、 问题:识别不同序列但切出的DNA片段具有相同末端序列的酶称为（）　
选项：
A:同尾酶
B:同位酶
C:同裂酶
D:甲基化酶
答案: 【同尾酶】

2、 问题:关于Ⅱ型限制性核酸内切酶，下列说法中错误的是（）　
选项：
A:每一种酶都有各自特异的识别序列
B:酶的识别序列中往往含有回文结构
C:每一种酶都在识别位点内部或两侧切割
D:每一种酶的识别序列都绝对不相同
答案: 【每一种酶的识别序列都绝对不相同】

3、 问题:Ⅱ限制性核酸内切酶切割双链DNA，水解磷酸二酯键可形成（）种不同的切口？
选项：
A:1
B:2
C:3
D:4
答案: 【3】

4、 问题:以下属于大肠杆菌中的DNA聚合酶的是
选项：
A:DNA聚合酶I
B:DNA聚合酶II
C:DNA聚合酶β
D:DNA聚合酶α
答案: 【DNA聚合酶I;
DNA聚合酶II】

5、 问题:基因工程中klenow片段的应用包括
选项：
A:补平DNA 3’凹端 
B:切平DNA 3’凸端
C:合成cDNA第二条链
D:Sanger合成测序
答案: 【补平DNA 3’凹端 ;
切平DNA 3’凸端;
合成cDNA第二条链;
Sanger合成测序】

【作业】第三章 载体 第三章 作业题（1）

1、 问题:请分析不同构型质粒电泳速率不一样的原因？
评分规则: 【 共价闭合环状DNA结构紧凑、体积小、所以最快；
线形的螺旋率依次降低，结构较共价闭合环状松散，电泳速率较慢；
开环线状双链DNA中的其中一条链短裂，此时的DNA分子就会变成环状分子，体积就比线状大很多，所以开环速度最慢。          
】

【作业】第三章 载体 第三章 作业题（2）

1、 问题:简述噬菌体的概念及重组噬菌体的构建方法。
评分规则: 【 1、噬菌体概念：是一类细菌病毒的总称，一般由蛋白质外壳和内部核酸分子组成。
2、重组噬菌体的构建方法：外源DNA片段+ 噬菌体DNA分子 → 重组的噬菌体DNA分子感染寄主细胞 → 用32P标记的探针做噬菌斑放射自显影杂交 → 获得阳性克隆 → 分离大量的重组体噬菌体DNA，实现克隆基因的扩增。
】

【作业】第三章 载体 第三章 作业题（3）

1、 问题:简述pUC118/pUC119噬菌粒载体的特点。
评分规则: 【 （1）具有小分子量的共价、闭合、环形的基因组DNA，可克隆高达10kb的外源DNA片段，并易于进行体外分离与操作；（2）编码有一个ampr基因作为选择记号，因此只有携带着pUCll8或pUCll9噬菌粒载体的大肠杆菌转化子细胞，才能够在含有氨苄青霉素的培养基中生长，便于转化子的选择；（3）拷贝数含量高，每个寄主细胞可高达500个，所以只要用少量的大肠杆菌细胞培养物，便可制备出大量的载体DNA；（4）存在着一个多克隆位点区，因此许多种不同类型的外源DNA限制片段，不经修饰便可直接插入到载体分子上；（5）由于多克隆位点区阻断了大肠杆菌lacZ基因的5′-端编码区，故可按照Xgal-IPTG组织化学显色反应试验，筛选重组体分子；（6）lacZ基因是置于lac启动子的控制之下，这样插入的外源基因（当其读码结构没有发生改变的情况下）便会以融合蛋白质形式表达，即产生出β半乳糖苷酶与外源蛋白质的融合产物；（7）含有一个质粒的复制起点，因此在没有辅助噬菌体的情况下，克隆的外源基因可以像质粒一样按常规方法，复制形成大量的双链DNA分子；（8）带有一个M13噬菌体的复制起点，所以在有辅助噬菌体感染的寄主细胞中，可以合成出单链DNA拷贝，并包装成噬菌体颗粒分泌到培养基中；（9）在pUC118和pUC119这两个载体中，多克隆位点区的核着酸序列取向是彼此相反的，于是它们当中的一个可转录克隆基因的正链DNA，另一个则可转录负链DNA；（10）可以直接对克隆的DNA片段进行核着酸序列测定，免去了从质粒载体到噬菌体的这一烦琐的亚克隆步骤。
】

第三章 载体 第三章 测试题

1、 问题:噬菌粒载体是由    的部分序列和质粒构建而成
选项：
A:单链噬菌体
B:λ噬菌体
C:BAC
D:YAC
答案: 【单链噬菌体】

2、 问题:柯斯质粒（cosmid）是一种 （）载体
选项：
A:容量最大的一种载体
B:由λ -DNA 的 cos 区与质粒重组而成的载体
C:是一种单链DNA环状载体
D:不能在受体细胞内复制，但可以表达的载体
答案: 【由λ -DNA 的 cos 区与质粒重组而成的载体】

3、 问题:基因工程载体应该具备那些特征？
选项：
A:自主复制能力
B:高效穿梭进入宿主细胞
C:标记基因
D:多克隆位点
答案: 【自主复制能力;
高效穿梭进入宿主细胞;
标记基因;
多克隆位点】

4、 问题:质粒的3种空间构型包括
选项：
A:开环DNA
B:闭环DNA
C:单链DNA
D:线形DNA
答案: 【开环DNA;
闭环DNA;
线形DNA】

5、 问题:理想质粒载体的条件是具有较大的分子质量和较低的拷贝数。
选项：
A:正确
B:错误
答案: 【错误】

【作业】第四章 基因工程的主要技术及其原理 第四章 作业题（1）

1、 问题:如何从动物组织中提取高质量的RNA？
评分规则: 【 所有离心管，枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染；
戴一次性口罩和一次性手套操作； 
提取RNA整个过程中，尽量在低温下操作；
在操作中当加入变性剂氯仿后，使两相混匀；
在提取核酸时，如样品浓度低，则应增加有机溶剂沉淀时间。